サイズ排除クロマトグラフィーとは?初心者にもわかる基本と活用ガイド共起語・同意語・対義語も併せて解説!

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サイズ排除クロマトグラフィーとは?初心者にもわかる基本と活用ガイド共起語・同意語・対義語も併せて解説!
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高岡智則

年齢:33歳 性別:男性 職業:Webディレクター(兼ライティング・SNS運用担当) 居住地:東京都杉並区・永福町の1LDKマンション 出身地:神奈川県川崎市 身長:176cm 体系:細身〜普通(最近ちょっとお腹が気になる) 血液型:A型 誕生日:1992年11月20日 最終学歴:明治大学・情報コミュニケーション学部卒 通勤:京王井の頭線で渋谷まで(通勤20分) 家族構成:一人暮らし、実家には両親と2歳下の妹 恋愛事情:独身。彼女は2年いない(本人は「忙しいだけ」と言い張る)


サイズ排除クロマトグラフィーとは?

サイズ排除クロマトグラフィーは、分子の“大きさ”を手掛かりに混ざった物質を分離する方法です。主に生物学や化学の研究で使われ、タンパク質や多様な分子の純度を確認する際に役立ちます。

原理のしくみ

この方法では、多孔性の充填材(ビーズ)がカラムの中に詰められます。分子はこのビーズの隙間(孔)を通るとき、孔の大きさに応じて通過する経路が変わります。大きな分子ほど孔に入れずに表面を流れるため速く移動します小さな分子は孔に入り込むため、長い経路をたどることになり、遅れて検出器に到達します。結果として“サイズの順”に分離されます。

ポイントと使いどころ

・形状や電荷の影響が少ないことが多く、比較的穏やかな条件で分離できます。

・分離の速度と分解能は充填材の性質に左右されます。

基本的な手順の概要

1. カラムに充填材を詰め、装填や平衡を行います。

2. 試料を注入し、ポンプで流します。

3. 検出器で分離後の成分を測定します。

実践での活用例

・タンパク質の分子量の概算、サイズに基づく分離、サンプルの分子量の推定など。

表で見る基本情報

特徴サイズ排除クロマトグラフィーの特徴は分子の大きさだけで分離する点です。
主な用途タンパク質のサイズ分離、分子量の推定、サンプルの純度確認
メリット条件が穏やかで、形による影響が少ない場合が多い
デメリット分離の精度はビーズの孔径とサンプルの形状に左右される

注意点

サイズ排除クロマトグラフィーは万能ではありません。分子の形状、凝集、アグリゲーション、溶媒の粘度などが結果に影響することがあります。実験計画では、試料の性質と充填材の特性を事前に調べ、比較的近いサイズレンジでの検証を行うことが重要です。


サイズ排除クロマトグラフィーの同意語

サイズ排除クロマトグラフィー
分子の大きさ(サイズ)を基準に分離するクロマトグラフィーの一種。充填材として多孔ゲルを用い、大きな分子は孔を通過しにくく、小さな分子が充填材を透過して分離される。
ゲル浸透クロマトグラフィー
Gel permeation chromatography の日本語表現の一つ。ゲル状の充填材の孔による分離で、分子の大きさに応じて透過度が異なる仕組みを用いる。
ゲル濾過クロマトグラフィー
SECの別称のひとつ。ゲル状の充填材の孔を利用して分子の大きさで分離する手法。
ゲルろ過クロマトグラフィー
SECの表現の一つ。日本語の表記ゆれとして用いられることがある表現。
分子サイズ排除クロマトグラフィー
分子のサイズを理由に排除・透過を利用して分離する、SECと同じ原理のクロマトグラフィー。
分子量排除クロマトグラフィー
分子量の大小を基準に排除・透過を分離する、SECと同じ原理のクロマトグラフィー。
サイズ選択クロマトグラフィー
分子のサイズを基準に選択的に分離するクロマトグラフィーの表現。
サイズによる分離クロマトグラフィー
分子のサイズ差に基づいて分離するクロマトグラフィーの言い換え表現。
分子径排除クロマトグラフィー
分子の径(サイズ)に基づき排除・透過を利用する分離手法の一つ。
分子篩クロマトグラフィー
分子のサイズを篩のように使って分離することを表す日本語表現。

サイズ排除クロマトグラフィーの対義語・反対語

イオン交換クロマトグラフィー
荷電を利用して分離する方法。溶質の電荷量や電荷の分布が分離の主因となり、サイズの大小ではなく電荷の性質で分離が決まる。
アフィニティクロマトグラフィー
特定の結合相互作用を利用して標品を捕捉し、結合条件を調整して洗脱する分離法。サイズは主役ではなく、ターゲット分子と特異的な結合を持つものの有無が分離を決める。
逆相クロマトグラフィー
疎水性の差を利用して分離する方法。分子の疎水性が高いほど保持が強く、サイズとは独立した分離原理で分離される。
ノーマルフェーズクロマトグラフィー
極性の違いを基に分離する方法。一般には極性差によって分離順が決まり、サイズ排除の原理とは異なる。
分配クロマトグラフィー
二相系の溶質の分配比の差を利用して分離する方法。溶質の分配係数の差によって分離が進むため、サイズではなく相互作用・溶解度の違いが主役。
相互作用ベースのクロマトグラフィー
イオン交換・アフィニティ・分配・逆相など、サイズ以外の分子間相互作用を利用して分離する総称。サイズ排除とは別の原理で分離を行う点が特徴。

サイズ排除クロマトグラフィーの共起語

ゲル浸透クロマトグラフィー
SECの別称。高分子の分子量分布を評価するクロマトグラフィー手法。
サイズ排除樹脂
SECに特化して設計された多孔性樹脂。分子の大きさに基づいて分離します。
ゲルビーズ
SECのカラム充填材として用いられる多孔性ビーズ。
充填材
カラムを満たす材料。ゲルビーズや樹脂などが主な充填材です。
分子量標準
分子量を既知とした標準物質。キャリブレーションに使います。
ポリスチレン標準
分子量標準として広く使われるポリスチレン系の標準物質。
標準曲線
検出信号と既知分子量の関係を示す曲線。分子量の推定に用います。
キャリブレーション
未知サンプルの分子量を推定するため、標準とデータを結びつける作業。
分子量分布
試料中の分子量の分布を表す指標。SECで評価します。
分子量範囲
SECが有効な分子量のレンジ
分離能
大きさで分子を分離する能力。
分解能
隣接するピークを分離できる程度。
保持時間
分析でサンプル分子がカラムに留まる時間。
溶出曲線
検出信号を溶出体積に対してプロットした曲線。
排除体積
大きい分子が早く溶出する際の体積領域。
溶出体積
分子サイズに応じて溶出する体積。
カラム
クロマトグラフィーの分析用カラム。
カラム
カラムの長さ。測定性能に影響します。
カラム径
カラムの内径。流動挙動に関与します。
ゲル充填材
カラムをゲル状充填材で満たす構成要素。
ルビーズ直径
充填ビーズの粒径。SECの分離特性に影響します。
粒径分布
ビーズの粒径の分布。
移動相
分析時に用いる溶媒の組成。
モバイル
移動相と同義。流れを作る溶媒。
水系SEC
水を主溶媒として用いるSEC。
有機溶媒系SEC
有機溶媒を主溶媒として用いるSEC。
溶媒組成
溶媒の組成・割合。
温度制御
カラム温度を安定させる管理。
カラム温度
カラムの温度。
流速
カラム内の流れ速度。
流量
単位時間あたりの溶媒の体積。
検出法
データを検出する方法。
UV検出
波長設定でUV光を利用した検出。
RI検出
屈折率で検出。
MALS検出
多角度光散乱を用いた検出。分子量・形状情報を取得。
再現性
条件を再現しても結果が再現する安定性
スケールアップ
研究室規模から工業規模へ拡張する過程。
適用範囲
SECが適用できる分子量・材料の範囲。
圧力
カラム内の圧力。機器運用の目安。
保持時間分解能
保持時間の測定精度・分離分解能。

サイズ排除クロマトグラフィーの関連用語

サイズ排除クロマトグラフィー
分子の大きさに基づいて分離を行うクロマトグラフィの一種。固定相は多孔質のゲルビーズで構成され、大きな分子は孔を通過できず早く洗い流され、小さな分子は多孔を通って長く滞留する。
ゲルろ過クロマトグラフィー
サイズ排除クロマトグラフィーの別表現。日本語では同義語として用いられることが多い。
ゲル透過クロマトグラフィー(GPC)
SECを英語名のGPCと呼ぶ表現。分子サイズを基準に分離する手法。
固定相
分離を実現するための固定物質。SECでは多孔質ゲルビーズが主な固定相となる。
移動相
コラムを流す液体。SECでは一般に水系緩衝液を用い、pH・塩濃度を安定させる。
ポアサイズ
固定相の孔径。分子が孔を通過できるかの判断基準であり、分離の基礎となる。
分子量カリブレーション
既知分子量の標準物質を用いて、エリュージョン体積と分子量の対応関係を作る作業。
標準物質
デキストラン、プルランなど、分子量が既知の分子量標準物質を用いてカリブレーションを行う。
カリブレーション曲線
分子量とエリュージョン体積の関係を表すグラフ。未知サンプルの分子量推定に使われる。
排除体積(Vo)
大きな分子が最初に排出されるコラム内の体積。Voは通常、コラムの“空隙体積”に対応する。
エリュージョン体積(Ve)
サンプルが検出器へ現れる体積。分子サイズに応じてVeは変化する。
固定相の材質(Sepharose系)
タンパク質分離に広く用いられる多孔質ゲルビーズの代表。水和性が高く非特異吸着を抑えやすい。
固定相の材質(Sephadex系)
ゲルろ過用のデキトラン系ビーズ。分子量標準としても使われることがある。
固定相の材質(Superdex系)
高分解能SEC用ゲルビーズ。中~大分子の分離に適する。
固定相の材質(Bio-Gel系)
経済的で汎用性の高いゲルビーズ系。実験用途や教育用にも利用される。
検出法(RI検出器)
屈折率の変化を検出してサンプル量を測る一般的な検出法。
検出法(UV検出)
UV光の吸収を利用して信号を得る方法。タンパク質は特定波長で吸収が高いことが多い。
検出法(SEC-MALS)
SECと多角度光散乱を組み合わせ、絶対分子量と分子量分布を推定できる検出系。
非特異吸着・相互作用の回避
固定相表面と試料分子の非特異的結合を避け、サイズベースの純粋な分離を目指す工夫が必要。
モバイル相・バッファー条件
pH、イオン強度、塩濃度など、分離の再現性と固定相の安定性に影響する条件の設計。
適用対象
タンパク質、ポリマー、核酸など、サイズ差を利用して分離・推定を行うサンプルに適用される。

サイズ排除クロマトグラフィーのおすすめ参考サイト


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