dpph法とは？初心者向けにやさしく解説！抗酸化活性を測る基本テスト共起語・同意語・対義語も併せて解説！

この記事を書いた人

高岡智則

年齢：33歳性別：男性職業：Webディレクター（兼ライティング・SNS運用担当）居住地：東京都杉並区・永福町の1LDKマンション出身地：神奈川県川崎市身長：176cm 体系：細身〜普通（最近ちょっとお腹が気になる）血液型：A型誕生日：1992年11月20日最終学歴：明治大学・情報コミュニケーション学部卒通勤：京王井の頭線で渋谷まで（通勤20分）家族構成：一人暮らし、実家には両親と2歳下の妹恋愛事情：独身。彼女は2年いない（本人は「忙しいだけ」と言い張る）

はじめに

みなさんは抗酸化という言葉を耳にしたことがありますか。体の中で発生する活性酸素を抑える働きをもつ成分のことを指します。dpph法は、その抗酸化力を「どれだけ弱った活性を回復させられるか」を測る、代表的な実験の一つです。この記事では中学生にも分かる言葉で、dpph法が何か、どういう場面で使われるのか、そして基本的な流れを紹介します。

dpph法とは

dpphとは 2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジルの略語です。DPPH は紫色のラジカル分子で、抗酸化物質が電子を渡すと DPPH の色が変化します。実験では紫色の溶液を作り、試料を加えて反応させ、反応後の色の変化を測定します。517 nm付近の光を使って吸光度を測定するのが一般的です。

原理と基本

原理はとてもシンプルです。DPPH 溶液は紫色で、光の吸収は強いです。抗酸化物質が DPPH に電子を渡すと、DPPH は安定した形になり吸収が下がります。このときの抑制率が抗酸化活性の指標になります。

手順の流れ

準備として DPPH溶液、測定用のスペクトロフォトメーター、試料溶液、適切な溶媒（エタノールなど）を用意します。

手順1 準備

DPPH溶液を作成します。濃度は実験条件により異なりますが、一般的には 0.1 mM 程度の濃度が使われます。

手順2 試料の反応

試料溶液を一定体積 DPPH 溶液に加え、遮光下で反応させます。反応時間は 20〜60 分程度が目安です。

手順3 測定

反応後、溶液の吸光度を測定します。対照は DPPH 溶液だけで作成し、試料の吸光度 A_sample、対照の吸光度 A_control を比較します。

手順4 計算

抑制率は次の式で求めます：抑制率 = (A_control - A_sample) / A_control × 100。

データの例と解釈

下の表は、架空のデータ例です。溶液名と 517 nm での吸光度、そして抑制率を示します。実際の数値は試料濃度や溶媒、条件で変わります。

項目	データの意味	代表値の例
対照	A_control	0.650
試料低濃度	A_sample 1	0.540
試料中濃度	A_sample 2	0.420
抑制率	パーセント変化	17 %

重要なポイントと注意点

注意点としては、反応時間、溶媒の種類、DPPH濃度、そして試料の溶媒への適合性です。これらが揃わないと吸光度の変化が正しく反映されず、結果が大きくぶれることがあります。

よくある誤解とヒント

よくある誤解としては、抑制率が高いほど必ず「健康に良い」わけではない、という点です。実際には複数の抗酸化成分が複雑に働くため、dpph法だけで全体を評価してはいけません。実験ノウハウとしては、同じ条件で複数の試料を比較すること、そして 同一濃度での比較を徹底することが大切です。

まとめ

この dpph法は、抗酸化活性を比較するための基本的な手法です。手順を守って、適切な対照と条件で測定すれば、食品やサプリの抗酸化力を相対的に評価できます。初めての方は、教科書的な例を模倣して、少数の材料から始めると理解が深まります。

dpph法の同意語

DPPH法: 2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル(DPPH)を用いて、試料の抗酸化活性を評価する一般的な測定法です。DPPHラジカルの色が変化する程度を吸光度で読み取り、抗酸化力を数値化します。
DPPHアッセイ法: DPPHを用いた抗酸化活性の評価手順（アッセイ）を指す言い換えです。反応後の吸光度の低下を測定して活性を評価します。
DPPH測定法: DPPHを利用して抗酸化活性を測る方法の総称です。測定は通常、反応後の吸光度の変化を比較して行います。
DPPHラジカル捕捉法: DPPHラジカルを捕捉する能力を評価する方法の別称。試料がラジカルを中和する程度を測定します。
DPPH自由基スカベンジング法: DPPHラジカルを自由基として捕捉・無力化する活性を評価するアッセイの表現です。スカベンジングは捕捉・除去の意味です。
DPPH抗酸化活性評価法: 試料の抗酸化活性を、DPPH法を用いて評価するための表現です。
DPPH法による抗酸化活性測定: DPPH法を使って抗酸化活性を具体的に測定する表現です。実験ではDPPHの吸光度変化を利用します。

dpph法の対義語・反対語

酸化促進性評価法: 物質が酸化を促進する性質を評価する方法。DPPH法が抗酸化活性を測るのに対して、こちらは酸化を進める性質やプロオキシダント活性を評価します。
酸化ストレス指標測定法: 生体内の酸化ストレスの程度を示す指標を測る方法（例：脂質の過酸化物、DNAの酸化ダメージマーカーなどを用います）。
ROS測定法: 反応性酸素種（ROS）のレベルを直接測定する方法。酸化の進行度を評価するのに使われます。
脂質過酸化指標測定法: 脂質の過酸化を示す指標（例：MDA、TBARS）を測定して酸化の進行度を評価します。
酸化力測定法: 酸化剤としての力を測る方法。酸化力は、物質が他の分子から電子を引き抜く能力を評価する観点です。
プロオキシダント活性測定法: 酸化を促進する活性（プロオキシダント活性）を評価する方法。

dpph法の共起語

DPPHラジアル: DPPHは安定なラジアル種で、抗酸化剤が還元してDPPHラジアルを無色へ還元する反応の対象となる化学種。
抗酸化活性: 抗酸化剤が活性を示す能力のこと。DPPH法はこの活性を数値化する方法の一つです。
吸光度: 物質が光を吸収する度合いのこと。DPPH法では試料溶液の吸光度を測定します。
吸光度変化: 反応前後の吸光度の差から、抗酸化作用の程度を評価します。
発色変化: DPPHの色が紫色から黄色へ変化する様子を観察・測定します。
517 nm: DPPHが最も強く吸収する波長。測定の主軸となる指標です。
517ナノメートル: 上と同じ波長を指します。
UV-Vis分光法: 紫外可視領域の光を用いて溶液の吸収を測定する分析法です。
分光光度計: 吸光度を測定する機器。DPPH法で広く使われます。
メタノール溶媒: DPPH法でよく用いられる有機溶媒の一つ。
エタノール溶媒: DPPH法でよく用いられる有機溶媒の一つ。
溶媒系: 実験で用いる溶媒の組成・比率を指します。
試料濃度: 測定対象の抗酸化成分の濃度。
反応時間: DPPH反応が進む所要時間。
室温: 反応を行う温度条件（一般的には常温）。
抑制率: DPPHラジカルの抑制割合を％で表した指標。
抑制率％: 同上、%表記の抑制率。
IC50値: 試料濃度がDPPH抑制を50%達成する濃度。抗酸化活性の比較指標。
Trolox当量: 抗酸化活性をTroloxで標準化した単位。
Trolox等価抗酸化活性: Trolox標準曲線を用いた抗酸化活性の表現。
標準曲線: 既知濃度の標準物質と吸光度の関係を示す曲線。
標準物質: Troloxなど、標準として用いる物質。
天然由来抗酸化物質: 果実・植物など天然由来の抗酸化成分。
植物抽出物: 植物を溶媒で抽出して得られる試料。
植物エキス: 植物由来のエキス。抗酸化成分を含むことが多い。
DPPH試薬: DPPHを含む試薬。測定の対象となる溶液。
DPPH溶液: DPPHが溶解した液体。試料と混合して反応させる。
ラジカル捕捉活性: DPPHラジカルを捕捉・還元する能力の総称。
自由基捕捉活性: 自由基を捕捉する総合的な抗酸化活性の表現。
試料の前処理: 粉砕・抽出・濃度調整など、測定前の処理工程。
抽出物: 有機溶媒などで抽出して得られる抗酸化成分を含む物質群。
有機溶媒抽出: 有機溶媒を用いた抽出法。
抗酸化評価: 抗酸化活性を評価する全体的なプロセス。
抑制率計算式: 抑制率 = (A_control - A_sample) / A_control × 100 の式で計算します。

dpph法の関連用語

DPPH法: DPPHラジアルを利用して試料の抗酸化活性を定量的に評価するスペクトロ光度計測法。DPPH溶液と試料を反応させ、色の変化から活性を算出します。
DPPHラジアル: 2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジルラジカル。DPPHは深紫色で、抗酸化剤が還元すると色が脱色します。
抗酸化活性: 試料が酸化を起こす反応を抑制・除去する能力の総称。DPPH法ではこの活性を数値化します。
DPPH消去率: 試料がDPPHラジアルをどれだけ消去したかを百分率で表した指標。通常は (A0−A1)/A0 × 100 で算出します。
最大吸収波長: DPPHの最大吸収は約517 nm。測定はこの波長で行います。
吸光度測定: 分光光度計を用いて、反応後のDPPHの吸光度を測定します。
溶媒: DPPHはエタノールやメタノールなどの有機溶媒、あるいは水系溶媒中に溶かして反応液を作ります。
試料濃度: 試料溶液の濃度は適切な範囲に設定します。濃度が高すぎると測定が難しくなることがあります。
反応時間: DPPHと試料が反応する時間。条件により数分から1時間程度かかることがあります。
反応温度: 反応は通常室温で行われますが、温度は反応速度と結果に影響します。
暗所条件: DPPHは光に敏感なため、反応と測定は暗所または光を遮断した環境で行います。
IC50値: 半最大抑制濃度。DPPHを50%消去する試料濃度を表し、抗酸化力の比較指標として用います。
標準物質: Trolox（水溶性ビタミン E の類縁体）などを標準として用い、標準曲線を作成します。
Trolox当量: 測定結果をTrolox当量抗酸化能（TEAC）として表す指標。Trolox濃度換算で比較できます。
標準曲線: Troloxの濃度とDPPH消去率の関係を作成する曲線。試料の活性をこの曲線から換算します。
モル吸光係数: DPPHの波長517 nmにおけるモル吸光係数（ε）。定量計算のパラメータとして使うことがあります。
背景吸収: 溶媒のみの吸光度を差し引くブランク測定。正確な反応の評価に必要です。
測定温度管理: 測定中の温度を安定させるための管理。温度変化は反応速度に影響します。
応用分野: 食品・飲料・植物由来エキス・健康補助食品などの抗酸化活性評価に広く用いられます。
限界と注意点: 色素の干渉や水系と有機溶媒の違い、光照射の影響など、DPPH法の留意点と限界点を把握して解釈します。