

高岡智則
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細胞分画・とは?基本の考え方
細胞分画とは、細胞を小さな細胞小器官に分けて調べる実験技術のことです。細胞は大きな核やミトコンドリア、リボソーム、小胞体などの部品でできており、これらは密度や大きさが異なるため混ざったままでは詳しく観察できません。そこで、部品を別々の成分に分けて個々の働きを調べる作業が必要になります。
細胞分画の目的は、特定の細胞小器官を取り出して純度を高めることです。純度が高いほど、実験結果の信頼性が上がり、部品の働きを詳しく理解できます。たとえばミトコンドリアを分画してエネルギーの作られ方を研究したり、核を取り出して遺伝子の働きを観察したりします。
主な分画の原理
細胞分画は「大きさと密度の違い」を利用します。遠心分画と呼ばれる方法では、遠心力をかけることで大きな部品は沈殿し、次に小さな部品が沈殿します。別の方法として密度の異なる液体の層を重ねて部品をそれぞれの密度で分離する密度勾配分離があります。いずれの方法も温度を一定に保つことが重要で、破砕の程度や緩衝液の組成にも注意が必要です。
実際の手順は以下のように大きく分かれます。まず細胞を機械的に破砕して細胞の中の成分をばらばらにします。次に初段の低速遠心で大きなものを沈殿させ、上清を取り出して次の段階へ進みます。続いて中速遠心で中位の構造物を集め、最後に高速遠心で最も小さな粒子を分離します。各段階で沈殿と上清を分け、必要に応じて再分画を行います。
実際の作業の流れ
実験室での作業は安全と衛生の確保が最優先です。適切な緩衝液を使い、温度管理を徹底します。試薬の混入を避け、分画中の混合を最小限に抑える工夫をします。ここで重要なのは、適切なサンプル量と機器の設定です。分画は繊細な手順の連続であり、経験と観察力が問われます。
表で見る細胞分画の比較
| 方法 | 特徴 | 主な目的 |
|---|---|---|
| 遠心分画の初段 | 大きな構造を沈殿させる | 核や大きな細胞小器官の回収 |
| 中速遠心 | 中くらいの構造を分離 | ミトコンドリアやリボソームの分画 |
| 高速遠心と密度勾配 | 微細な小器官まで分離 | 高純度の小器官分画 |
概念の補足として以下を覚えておくと良いです。沈殿と上清の扱いが分画の要であり、どの段階で何を取り出すかを前もって決めておく必要があります。沈殿した粒子の性質は温度や緩衝液の条件に影響されます。最終的には分画後の部品を電子顕微鏡で観察したり化学的な分析を行ったりします。
まとめと初心者へのアドバイス
細胞分画は難しそうに見えますが、基本は「部品を分ける作業」と「分離の段階を順に進めること」です。初めての人は手順を段階的に練習していくと良いでしょう。実験ノートをつけ、結果の再現性を確かめ、困った時には先輩や教員に相談してください。継続して学ぶことが上達の近道です。
実際の研究分野では、例えば細胞のエネルギー産生を担うミトコンドリアの分画を用いて機能を調べたり、核分画を通じて遺伝子発現の仕組みを理解したりします。細胞分画は生物学の研究だけでなく、医薬品開発や病理研究、教育現場などさまざまな場面で活用されている基本的な技術です。
細胞分画の同意語
- 細胞成分分画
- 細胞を構成する各成分(核・ミトコンドリア・リボソーム・リソソーム・膜系小胞など)を別々の成分として分ける作業・手法の総称です。主に遠心分離法や溶液条件の調整で行われます。
- 細胞成分分離
- 細胞内の成分を化学的・物理的手段で分離すること。分画と同義で使われることが多く、手法名として使われることもあります。
- 細胞分画法
- 細胞成分を分離・分画する際の具体的な方法・手順を指す表現。論文や実験ノートでよく使われます。
- 分画法
- 分画のうち、特に細胞成分を分離する作業を指す言い方。前提は同義語として使われることが多いです。
- 超遠心分画
- 超遠心機を使って細胞成分を分離する代表的な分画法のひとつ。高い遠心力を用いて小さな粒子まで分離します。
- 超遠心分離
- 超高速・超遠心力を用いて細胞成分を分離する作業。細胞分画の中心的技術の一つです。
- 細胞内小器官分画
- 細胞内の小器官(核、ミトコンドリア、リソソーム、ゴルジ体、小胞体など)を分離して個別に解析する分画のこと。
- 細胞内容物分画
- 細胞内の内容物を分画して別々の成分として取り出す作業。
細胞分画の対義語・反対語
- 非分画
- 分画を行わず、細胞をそのままの状態で扱うこと。
- 全細胞観察
- 細胞を分画せず、全体を観察・解析すること。
- 全細胞分析
- 細胞全体を対象として解析すること。
- 非分離
- 分離を伴わない、混在状態を前提とすること。
- 一体的解析
- 各成分を分けず、全体を一つとして解析するアプローチ。
- 総合解析
- 個々の成分に分けず、総合的にデータを解釈する方法。
- 分画不要
- 分画の手順を必須としない、不要とする考え方。
- 全成分同時解析
- 細胞内の全成分を同時に解析すること。
細胞分画の共起語
- 遠心分離
- 試料を回転させて重さの差で細胞成分を沈降させ、分画する基本的な手法。
- 差分遠心分離
- 細胞を均質化した後、沈降速度の異なる成分を段階的に分離する方法。
- 超遠心分離
- 非常に高速の遠心を用いて、微小な粒子や膜小器官を分離する手法。
- 密度勾配遠心分離
- 比重の異なる勾配中を試料を沈降させ、特定の密度の粒子を分離する方法。
- 核
- 細胞の遺伝情報を格納する核。分画では最初の沈降物として得られやすい成分。
- ミトコンドリア
- エネルギーを生み出す細胞小器官。通常高密度の分画として得られる。
- リソソーム
- 細胞内の不要物を分解する小器官。分画の中で特定の沈降物として現れる。
- ペルオキシソーム
- 過酸化物を分解する小器官。分画の対象として分離されることがある。
- 粗面小胞体
- リボソームが付着する小胞体で、タンパク質合成に関与する分画要素。
- 滑面小胞体
- リボソームのない平滑な小胞体で、脂質合成などが主な機能の分画要素。
- ゴルジ体
- タンパク質の修飾・振り分けを行う細胞小器官。分画の対象に含まれることが多い。
- 細胞質
- 細胞の液体成分と溶質が満ちる領域。代謝反応が活発に行われる場所。
- 細胞質基質
- 細胞質の液体成分のうち、代謝が行われる主な場所。
- リボソーム
- タンパク質を作る小さな粒子。遊離リボソームとRERに結合して存在する。
- 均質化
- 細胞膜を壊して均一な懸濁液にする前処理工程。
- 遠心機
- 遠心分離を実施する装置。回転数を調整して分画を行う。
- 遠心管
- 試料を入れて遠心分離を行うための容器。
- 沈降係数(S値)
- 沈降の速さを示す単位で、分画の基準になる目安(Svedberg単位)。
- 膜系
- 細胞膜を含む分画要素で、分配の対象となることがある。
細胞分画の関連用語
- 細胞分画
- 細胞を構成するオルガネラや成分を、目的の分画として分離し、個別に研究できるようにする方法。主に遠心分離を用いる。
- 遠心分離
- 遠心力を利用して細胞成分を大きさや密度の違いで分離する基本的な技術。
- 差分遠心分離
- 大きさの違いを利用して、核を沈降させてからミトコンドリア、リソソームなどを順次沈降させる段階的な分離法。
- 超高速遠心分離
- 非常に高速で回転させ、微細な粒子を分離する技術。
- 超遠心分離
- 超高速遠心分離と同義。極高回転数での分画を指す。
- 密度勾配遠心分離
- 密度勾配を用いて、同じ大きさの粒子を密度の違いで分離する高度な方法。
- 等密度勾配遠心分離
- 等密度勾配の技術で、密度がほぼ同じ成分を分離する方法。
- ホモジネーション/匀化
- 細胞を均一に破砕して匀化液を作る作業。分画の前処理として行う。
- ホモジネート/匀化液
- 匀化処理後の、細胞成分を含む溶液。
- オルガネラ分画
- 核、ミトコンドリア、リソソームなど、特定の細胞小器官を含む分画を指す総称。
- 核分画
- 核を含む分画。核由来の成分を分析する際に作製する。
- ミトコンドリア分画
- ミトコンドリアを含む分画。エネルギー代謝関連の研究に使われる。
- リソソーム分画
- リソソームを含む分画。加水分解酵素の活性を調べる際に重要。
- ペルオキシソーム分画
- 過酸化物酵素を含む分画。脂質代謝などの研究に使われる。
- 小胞体分画
- 粗面小胞体・滑面小胞体を含む分画。タンパク質合成や折りたたみの研究に用いる。
- ゴルジ体分画
- ゴルジ体を含む分画。タンパク質の加工・仕分けに関与する成分を分ける。
- プラズマ膜分画
- 細胞膜を含む分画。膜タンパク質・脂質の研究に用いられる。
- 細胞質分画
- 細胞質基質を含む分画。酵素活性や代謝系の分析に使われる。
- 核/核膜分画
- 核膜を含む分画。遺伝子関連成分の分析などに用いる。
- エンドソーム分画
- エンドソームを含む分画。内在化した受容体やタンパク質の追跡に使われる。
- 膜分画
- 細胞膜や膜系を含む分画の総称。
- 低温条件
- 分画はタンパク質の分解を避けるため、低温で行うことが多い。
- バッファー/緩衝液
- pHを安定化させ、タンパク質や酵素を保護する液体。
- プロテアーゼ阻害剤
- タンパク質分解を防ぐための薬剤を分画に加える。
- 再懸濁
- 分離した分画を再び均一な溶液に戻す作業。
- 分画純度
- 特定の分画に目的の成分がどれだけ含まれているかの指標。
- 比重/密度
- 物質の密度。密度勾配で分離の基準になる。
- マーカー酵素
- 分画を同定するため、オルガネラ特異的な酵素活性を測定する指標。
- 標識/ラベル化
- 分画を識別・追跡するための蛍光・抗体などによる標識法。



















